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武汉恒意赛生物科技有限公司
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武汉恒意赛生物科技有限公司
入驻年限：8 年
- 联系人：
叶凯
- 所在地区：
湖北 武汉市 江夏区
- 业务范围：
技术服务、细胞库 / 细胞培养、试剂、抗体、耗材、ELISA 试剂盒、实验室仪器 / 设备、论文服务
- 经营模式：
科研机构 生产厂商
公司新闻/正文
病理染色技术专题丨番红固绿染色
115 人阅读发布时间：2026-01-09 10:11
病理染色技术专题
为了更好地帮助科研伙伴们熟悉各类实验，我们特推出此类专题。希望可以用积累的实验经验，为大家答疑解惑，推进科研之路。
PART-1 实验原理：
1.番红O：Safranin O，碱性阳离子染料，常用于骨组织石蜡切片染色，与软骨组织中的多糖阴离子基团，如硫酸软骨素、硫酸角质素结合呈红色。也可以将植物组织木化、角化、栓化的细胞壁和细胞核染成红色。
2.固绿FCF：Fast Green FCF，酸性染料，常与番红搭配使用，染骨组织石蜡切片，可以将成骨、胶原纤维染成绿色，也可将植物筛管、薄壁细胞、含纤维素细胞壁染成绿色。
番红固绿染色结果示例
PART-2 染色步骤
1、骨组织：软骨基质呈深红色，细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织呈灰绿色。
（1）石蜡切片脱蜡至水：将切片放入①二甲 ben15min-②二甲 ben15min-③无水乙醇5min-④无水乙醇5min-⑤90%酒精-⑥75%酒精5min，自来水洗。
（2）用组化笔在组织周围画圈，防止后面过程孵育液流走，纯水洗。
（3）Weigert铁苏木素染液，现配现用，染色3~5min，纯水洗。
（4）酸性分化液分化15s，纯水洗10min。
（5）固绿染2~5min，快速用弱酸溶液洗涤切片10~15s。
（6）番红染5~8min，无水乙醇洗去多余染液。
（7）无水乙醇脱水。
（8）二甲 ben透明，中性树胶封片。
图片示例
2、植物：韧皮部、形成层、芽尖、根尖分生区等新生组织结构呈绿色，木质化、木栓化的结构呈红色(软化后的木质化结构成分流失，结果呈绿色)。
（1）石蜡切片脱蜡至水：将切片放入①二甲 ben15min-②二甲 ben15min-③无水乙醇5min-④无水乙醇5min-⑤90%酒精-⑥75%酒精5min，自来水洗。
（2）用组化笔在组织周围画圈，防止后面过程孵育液流走，纯水洗。
（3）番红染色2min。
（4）切片依次经50%酒精、70%酒精、80%酒精，各3~5s。
（5）固绿染6~20s。
（6）切片用无水乙醇喷洗数秒，过2缸二甲 ben，各5min，中性树胶封片。
图片示例
PART-3 结果分析与评价
01、膝关节：覆盖在关节表面的薄层透明软骨，是固态的结缔组织，具有弹性，可以承受压力和摩擦，起到支撑、保护作用，可能会因为急性外伤、慢性劳损、退行性病变，使软骨出现撕裂、磨损、变薄等情况。比如骨关节炎osteoarthritis, OA是常见的退行性病变，如果软骨基质丢失、表面粗糙、出现裂隙、结构紊乱，即关节软骨损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，导致番红固绿染色时，番红不着色或者颜色很浅。
02
脊椎
脊椎：主要由脊椎骨和椎间盘构成，起活动、支撑、保护、平衡作用。椎间盘是由纤维环、髓核及上下椎体的透明软骨板组成，脊柱常见病变，比如颈椎病、腰椎间盘突出症，因年龄增长或者长期劳损，椎间盘的弹性和韧性可能会减弱，纤维环即多层交叉排列的纤维软骨可能会出现破裂、磨损等组织结构异常，在番红固绿染色时，番红着色深浅不一。
